| 猪IL-2基因的克隆、序列分析及其杆状病毒表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 郭小参,崔保安,陈红英,王彦彬,方剑玉,吕晓丽,王东方.猪IL-2基因的克隆、序列分析及其杆状病毒表达载体的构建[J].中国兽医学报,2009,29(2). |
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| 作者姓名： | 郭小参 崔保安 陈红英 王彦彬 方剑玉 吕晓丽 王东方 |
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| 作者单位： | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南,郑州,450002
2. 南京农业大学,动物医学院,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家食品安全重大攻关专项项目 |
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| 摘 要： | 参照GenBank发表的猪IL-2 cDNA基因序列设计1对引物,将猪脾淋巴细胞在伴刀豆球蛋白A(Con A)的刺激下体外培养27 h后,提取激活淋巴细胞总RNA,进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆到pGEM-TEasy载体上并测序.测序结果显示,克隆的猪IL-2 cDNA全长为516 bp,开放阅读框(ORF)包含465 bp,编码154个氨基酸,相对分子质量为17 400,等电点为5.27,此cDNA与已报道的猪IL-2同源性为100%.与猫、牛、鸡、犬、鸭、山羊、马、人、家鼠等的IL-2基因进行比较分析,核苷酸同源性分别为83.7%、82.6%、28.2%、80.6%、29.6%、83.4%、81.3%、82.0%和61.5%.将此IL-2基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual后获得了重组质粒pFBD-IL2,进而转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,发生转座作用;经抗性及蓝白斑筛选得到了含猪IL-2基因的重组DNA,将其命名为Bacmid-IL2.本试验为进一步在昆虫细胞中表达猪IL-2基因、开发研制新型免疫佐剂奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪白细胞介素-2 克隆 序列分析 杆状病毒 |
Cloning, genetic analysis and baculovirus expression vector construction of porcine interleukin-2 |
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| GUO Xiao-can,CUI Bao-an,CHEN Hong-ying,WANG Yan-bin,FANG Jian-yu,LU Xiao-li,WANG Dong-fang.Cloning, genetic analysis and baculovirus expression vector construction of porcine interleukin-2[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(2). |
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| Authors: | GUO Xiao-can CUI Bao-an CHEN Hong-ying WANG Yan-bin FANG Jian-yu LU Xiao-li WANG Dong-fang |
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