| 甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 武立伟,李霆,杨世梅,王慧煜,梅琳,韩雪清.甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载体的构建与表达[J].中国畜牧兽医,2014,41(8):66-70. |
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| 作者姓名： | 武立伟 李霆 杨世梅 王慧煜 梅琳 韩雪清 |
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| 作者单位： | 1.中国检验检疫科学研究院，北京 100029；2.西北民族大学，甘肃兰州 730124 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划资助项目（973项目）流感等病毒在不同宿主中的复制机制(2011CB504704-X)；基本科研业务费H7N9流感病毒非结构蛋白NS1的功能研究(2014JK007)。 |
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| 摘 要： | 本试验旨在构建甲型H7N9流感病毒非结构蛋白（NS1）真核表达载体，并在293T细胞中表达其编码的NS1蛋白。首先提取安徽分离株甲型H7N9流感病毒（A/Anhui/3/2013(H7N9)）的总RNA，通过RT-PCR技术获得了甲型H7N9流感病毒H7N9 NS1全长基因，然后将其克隆至载体pcDNA4-Flag-HA中构建pcDNA4-Flag-HA-NS1真核重组表达载体，经酶切及测序鉴定正确后将质粒pcDNA4-Flag-HA-NS1转染到293T细胞中，通过Western blotting鉴定NS1蛋白的表达。结果表明成功克隆了NS1全长基因，构建了甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载pcDNA4-Flag-HA-NS1，并在293T细胞中转染表达，Western blotting确定了NS1蛋白的成功表达。该表达载体的成功构建及在293T细胞中成功表达NS1蛋白，为后期开展流感病毒NS1蛋白功能及与真核细胞中的蛋白相互作用奠定了基础。
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Construction and Expression of NS1 Protein Eukaryotic Expression Vector of Influenza A Virus Subtype H7N9 |
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| WU Li-wei,LI Ting,YANG Shi-mei,WANG Hui-yu,MEI Lin,HAN Xue-qing.Construction and Expression of NS1 Protein Eukaryotic Expression Vector of Influenza A Virus Subtype H7N9[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014,41(8):66-70. |
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| Authors: | WU Li-wei LI Ting YANG Shi-mei WANG Hui-yu MEI Lin HAN Xue-qing |
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| Institution: | 1. Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100029, China; 2. Northwest University for Nationalities, Lanzhou 730124, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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