| 金刚烷胺单克隆抗体的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 范素菊,李嘉,李森,杨兴东.金刚烷胺单克隆抗体的制备和鉴定[J].江苏农业科学,2019,47(15). |
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| 作者姓名： | 范素菊 李嘉 李森 杨兴东 |
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| 作者单位： | 周口职业技术学院农牧工程学院,河南周口466000;周口师范学院食品药品检验检测中心,河南周口466001;周口职业技术学院农牧工程学院,河南周口,466000;周口师范学院食品药品检验检测中心,河南周口,466001 |
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| 基金项目： | 河南省自然科学基金;河南省科技攻关计划 |
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| 摘 要： | 为制备金刚烷胺(AMD)的单克隆抗体(mAb),改造AMD的半抗原,采用EDC/NHS法合成人工免疫原AMD-BSA和检测抗原AMD-OVA,经紫外扫描和凝胶电泳进行鉴定,AMD与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵白蛋白(OVA)]成功偶联;用被免疫原(AMD-BSA)免疫BALBC/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,获得AMD杂交瘤细胞株,腹腔注射小鼠后,得到抗AMD的mAb。小鼠免疫后的多抗血清的效价均在6.4×10~3以上,所制得的杂交瘤细胞上清液的效价为3.6×10~2～1.0×10~3,2D5细胞株的腹水效价为5.12×10~5,对AMD的IC_(50)值为1.02μg/L,除与金刚乙胺的交叉反应率为9.82%,与其他结构类似物无交叉反应性。表明获得了高价、敏感和特异的抗AMD的单克隆抗体,为进一步的免疫学快速检测提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 金刚烷胺 免疫原 单克隆抗体 ELISA 抗体制备 抗体鉴定 |
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