| ANXA2真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 刘容秀,凌莹,喜琴琴,李琼毅.ANXA2真核表达载体的构建[J].现代畜牧兽医,2019(8). |
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| 作者姓名： | 刘容秀 凌莹 喜琴琴 李琼毅 |
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| 作者单位： | 西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,730030;西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃 兰州,730030 |
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| 基金项目： | 国家级大学生创新创业训练计划项目;创新项目;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以膜联蛋白A2(Annexin A2,ANXA2)真核表达载体的构建过程为基础,介绍一种易于成功构建真核表达载体的方法。以Hela细胞来源的cDNA为模板,半套式PCR为基础,通过两次PCR的方法,可获得5’端添加Kozak序列并融合表达HA标签基因和ANXA2的基因片段Kozak-HA-ANXA2,回收后克隆到pMD-18T克隆载体,获得合适的酶切位点,再采用双粘端连接法将其克隆入慢病毒真核表达载体pTRIP中。结果显示,经双酶切和测序之后确定真核重组载体pTRIP-HA-humANXA2构建成功。通过半套式PCR方法构建真核表达载体成功率高,为下一步细胞表达试验创造条件。
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| 关 键 词： | 真核表达载体 载体构建 膜联蛋白A2 |
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