|
|||||
|
|
| 高盐低pH值法优化多花黄精叶绿体DNA提取方法 | |
| 作者单位： | 浙江理工大学生命科学与医药学院,浙江省植物次生代谢调控重点实验室,杭州,310018 |
| 基金项目： | 浙江省重点研发计划项目;杭州市农业与社会发展科研项目;基本科研业务费项目 |
| 摘 要： | 本研究采用高盐低p H值法提取多花黄精叶绿体DNA (cpDNA),并通过L9(33)正交试验,以缓冲液中的Na Cl浓度、叶片用量及去核离心力为考察因素,优化多花黄精cpDNA提取工艺,并设计核基因组及叶绿体基因组特异性引物,验证cpDNA质量。结果表明,当NaCl浓度为1.50 mol/L,叶片用量为10 g,去核离心力为600×g时,以提取的cpDNA为模板,进行PCR扩增,能扩增出叶绿体基因片段且没有扩增出核基因片段,表明提取的cpDNA没有核基因组污染,质量好,产率高,能满足后续基因扩增等实验要求,该条件为本研究的最佳条件。该方法简便快速,对实验仪器要求不高,成本低,能够为黄精属植物cpDNA的提取提供参考。 |
| 关 键 词： | 多花黄精 叶绿体DNA 高盐低pH值法 正交试验 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |