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榅桲果实CAD基因的克隆、序列分析及表达
引用本文:车玉红,杨波,郭春苗,木巴热克·阿尤普,吴津蓉,杜鹃.榅桲果实CAD基因的克隆、序列分析及表达[J].新疆农业科学,2020,57(5):814-821.
作者姓名:车玉红  杨波  郭春苗  木巴热克·阿尤普  吴津蓉  杜鹃
作者单位:1.新疆农业职业技术学院, 新疆昌吉 831100;2.新疆农业科学院园艺作物研究所, 乌鲁木齐 830091
基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金(2018D01A45);自治区农牧科技骨干人才培养项目
摘    要:【目的】研究榅桲果实木质化与CAD基因的关系。【方法】基于GenBank报道的近缘物种CAD基因cDNA序列,应用Primer Premier 5.0 软件设计PCR 扩增引物。提取榅桲总RNA,经反转录后合成cDNA,应用RT-PCR 方法成功扩增出CAD 基因片段并克隆到pMD18-T 载体。通过DNAstar软件进行同源序列比对,ClustalX结合MEGA4.1软件构建系统进化树,采用Protparam在线程序分析蛋白质的理化性质,用DNAstar的Protean程序预测二级结构。通过间苯二酚染色鉴定果肉发育时期木质素的积累程度,并利用RT-qPCR对CAD基因在发育期时期的表达规律进行检测。【结果】榅桲CAD基因其开放阅读框(ORF)序列为1 071 bp,编码356个氨基酸,与其他物种序列同源性最高达96%,进化关系上与苹果较近。在果实6个发育时期,木质素积累逐渐降低,而CAD基因表达与果实木质化程度紧密相关,随着木质素合成趋缓呈现一个逐步下调的趋势。【结论】CAD基因是调控榅桲果实木质化的关键基因。

关 键 词:榅桲  CAD基因  克隆  序列分析  表达  
收稿时间:2019-12-30

Cloning,Sequence Analysis and Expression of CAD Gene in Quince (Cydonia oblonga Mill) Fruit
CHE Yuhong,YANG Bo,GUO Chunmiao,Mubareke Ayoupu,WU Jinrun,DU Juan.Cloning,Sequence Analysis and Expression of CAD Gene in Quince (Cydonia oblonga Mill) Fruit[J].Xinjiang Agricultural Sciences,2020,57(5):814-821.
Authors:CHE Yuhong  YANG Bo  GUO Chunmiao  Mubareke Ayoupu  WU Jinrun  DU Juan
Institution:1.Xinjiang Agricultural Professional Technology College; Changji Xinjiang 831100, China;2.Institute of Horticultural Crops,Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Urumqi 830091, China
Abstract:
Keywords:Cydonia oblonga Mill  CAD gene  clone  sequence analysis  expression  
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