| PMA-qPCR方法快速检测细菌性果斑病菌活菌的研究 |
| |
| 引用本文： | 郝芳敏,丁伟红,马二磊,严蕾艳,黄芸萍,王毓洪,臧全宇.PMA-qPCR方法快速检测细菌性果斑病菌活菌的研究[J].浙江农业科学,2023,64(3):664-669. |
| |
| 作者姓名： | 郝芳敏 丁伟红 马二磊 严蕾艳 黄芸萍 王毓洪 臧全宇 |
| |
| 作者单位： | 宁波市农业科学研究院 宁波瓜菜育种重点实验室, 浙江 宁波 315040 |
| |
| 基金项目： | 宁波市农业科学研究院瓜菜良种良法创新工程项目-瓜类健康种子生产及采后加工检测技术研究(2019CXGC002);浙江省西甜瓜良种育繁推科技创新平台(ZJ2019-80);国家西甜瓜产业技术体系(nycytx-36);宁波市瓜菜育种重点实验室(2014A22007) |
| |
| 摘 要： | 本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与qPCR技术相结合，建立了一种适于细菌性果斑病菌株活细胞快速检测的PMA-qPCR方法。通过试验控制单因素变化，对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化，确立了PMA终浓度为9μg·mL-1,曝光时间为8 min的PMA预处理体系，能有效抑制1.0×107 mL-1灭活死菌的扩增，对活菌的扩增没有影响。当活菌数在2.0×101～2.0×106 mL-1,qPCR反应体系中活菌数与Ct值呈线性相关(R2=0.982 7)。本文建立的PMA-qPCR方法可在一定范围内有效去除细菌性果斑病死菌的干扰，定量检测出活菌数量，研究结果可为植物细菌性果斑病的流行规律研究提供新的技术支撑，并能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。
|
| 关 键 词： | 细菌性果斑病菌 叠氮溴化丙锭 活菌检测 快速检测 |
| 收稿时间： | 2022-09-15 |
|
| 点击此处可从《浙江农业科学》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《浙江农业科学》下载免费的PDF全文 |
|
