非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 余斌,徐丽华,李军星,苏菲,叶十一,袁秀芳.非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立[J].浙江农业科学,2023,64(4):964-967. |
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作者姓名: | 余斌 徐丽华 李军星 苏菲 叶十一 袁秀芳 |
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作者单位: | 浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所,浙江 杭州 310021 |
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基金项目: | 浙江省重点研发计划(2020C02012) |
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摘 要: | 为建立一种快捷高效的非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测方法,本研究根据GenBank中登录的ASFV B646L基因保守区序列设计引物和探针,通过优化PCR反应体系和反应条件,建立了非洲猪瘟Taqman荧光定量(ASFV-qPCR)检测方法,验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示:本研究所建立的检测方法特异性强,与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均无交叉反应;灵敏度高,能检出10拷贝阳性质粒DNA;重复性好,组内和组间重复试验变异系数均小于1.5%。本研究为非洲猪瘟快速诊断提供了有力技术支撑,为进一步开发ASFV多重荧光PCR检测技术奠定了坚实的基础。
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 荧光定量PCR B646L 检测 |
收稿时间: | 2022-06-23 |
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