| 猪带绦虫不同阶段45W-4BX和18kD基因联合表达及保护性分析 |
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| 引用本文： | 骆学农,郑亚东,窦永喜,郭爱疆,侯俊琳,景志忠,才学鹏.猪带绦虫不同阶段45W-4BX和18kD基因联合表达及保护性分析[J].中国农业科学,2007,40(2):385-390. |
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| 作者姓名： | 骆学农 郑亚东 窦永喜 郭爱疆 侯俊琳 景志忠 才学鹏 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 / 家畜疫病病原生物学国家重点实验室／甘肃省动物寄生虫病重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 【目的】获得不同发育阶段基因联合表达的具有良好免疫保护性的重组抗原，为研制高效的猪囊虫基因工程疫苗奠定基础。【方法】PCR扩增截去45W-4B基因的信号肽和C端17个疏水氨基酸序列，经BamH I和EcoR I酶切后与表达载体pGEX－4T-1连接转化BL21感受态细胞，酶切及PCR扩增鉴定阳性克隆。测序正确的质粒经EcoR I和Not I酶切处理后与截去信号肽的18 kD基因连接，构建双基因融合表达载体pGEX-4BX/18。用IPTG诱导的表达产物，进行SDS－PAGE电泳、Western blot分析活性。分别用300μg重组GST-4BX、GST-4BX/18蛋白免疫猪，间接ELISA测定抗体水平。感染后90 d剖检计算各组的减虫率，比较评价重组抗原的免疫保护性。【结果】4BX/18 kD在大肠杆菌中获得高效表达，表达产物为50 kD的融合蛋白，并能被人囊虫和感染初期的猪囊虫阳性血清所识别。重组抗原免疫猪后45 d抗体达到峰值，联合表达重组抗原的减虫率为97%，GST-4BX免疫组的减虫率为95%。【结论】重组抗原4BX 和4BX/18kD均具有较好的免疫保护效果，有望利用它们研制出抗猪囊尾蚴病的高效疫苗。
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| 关 键 词： | 猪带绦虫 45W-4BX 18kD 联合表达 免疫保护性分析 |
| 收稿时间： | 2005-9-21 |
| 修稿时间： | 2005-09-20 |
Combining Expression and Protective Efficacy of 45W-4BX and 18kD from Different Stages of Taenia solium |
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| LUO Xue-nong,ZHENG Ya-dong,DOU Yong-xi,GUO Ai-jiang,HOU Jun-lin,JING Zhi-zhong,CAI Xue-peng.Combining Expression and Protective Efficacy of 45W-4BX and 18kD from Different Stages of Taenia solium[J].Scientia Agricultura Sinica,2007,40(2):385-390. |
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| Authors: | LUO Xue-nong ZHENG Ya-dong DOU Yong-xi GUO Ai-jiang HOU Jun-lin JING Zhi-zhong CAI Xue-peng |
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| Institution: | Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province / State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology Lanzhou Veterinary Research Institute / Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | 45W-4BX 18kD |
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