| cDNA芯片结合抑制性差减杂交技术构建对虾白斑综合征病毒表达基因和螯虾免疫相关基因文库 |
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| 引用本文： | 曾勇.cDNA芯片结合抑制性差减杂交技术构建对虾白斑综合征病毒表达基因和螯虾免疫相关基因文库[J].水产学报,2006,30(5):690-694. |
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| 作者姓名： | 曾勇 |
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| 作者单位： | 1. 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095
2. 南京医科大学,江苏,南京,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;瑞典国际科学基金 |
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| 摘 要： | 以克氏原螯虾做为对虾白斑综合征病毒（WSSV）的增殖模型，试验组接种WSSV，对照组接种PBS。分别以试验组为检测组（tester）、对照组为驱逐组（driver），进行正向抑制性差减杂交；以对照组为tester、试验组为driver，进行反向SSH。将获得的正、反向差减杂交产物克隆入质粒载体PinPointTM Xa1 TVector，再转化大肠杆菌DH5α,共构建了2个分别含1620和400个克隆的正、反向差减文库。经PCR扩增，1514个差减克隆得到产物，其中正向差减克隆1221个，反向差减克隆293个。获得的PCR产物经浓缩、变性处理，用自动点样仪点制于尼龙膜载体上，制成cDNA芯片，用cDNA芯片对SSH获得的差减克隆进行鉴定，共获得差异表达克隆278个，其中攻毒组高表达克隆255个；对照组高表达克隆23个。
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| 关 键 词： | 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 表达基因 免疫相关基因 cDNA芯片 |
| 文章编号： | 1000-0615（2006）05-0690-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-11 |
| 修稿时间： | 2005-12-11 |
Construction the cDNA library of expression profiles of penaeid shrimp WSSV and immune genes of crayfish with suppression subtractive hybridization and cDNA chip |
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| ZENG Yong.Construction the cDNA library of expression profiles of penaeid shrimp WSSV and immune genes of crayfish with suppression subtractive hybridization and cDNA chip[J].Journal of Fisheries of China,2006,30(5):690-694. |
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| Authors: | ZENG Yong |
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| Institution: | College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Procambarus clarkii white spot syndrome virus(WSSV) expression gene immune gene cDNA chip |
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