| 苏云金芽胞杆菌N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)在毕赤酵母中的优化表达 |
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| 引用本文： | 简思美,何晶晶,毛惠民,杨梅.苏云金芽胞杆菌N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)在毕赤酵母中的优化表达[J].农业生物技术学报,2014(11). |
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| 作者姓名： | 简思美 何晶晶 毛惠民 杨梅 |
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| 作者单位： | 福建师范大学生命科学学院,福州,350108 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金，福建省教育厅项目 |
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| 摘 要： | 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(auto inducer inactivation A,aiiA)编码的N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine lactonase,AiiA)能够水解植物病原菌群体效应的信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactone,AHL),进而使革兰氏阴性细菌群体感应受到抑制,减弱病原菌的致病性。本研究将aiiA基因连接至分泌型穿梭表达载体pPICZαB,获得重组表达质粒p PICZαB-aiiA,线性化后电击转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,获得重组工程菌GS115-p PICZαBaiiA。利用定点突变技术,对aiiA基因进行密码子优化,获得重组工程菌GS115-p PICZαB-MaiiA。以终浓度为1%的甲醇、28℃条件下诱导表达,重组工程菌GS115-p PICZαB-aiiA和GS115-p PICZαB-MaiiA均成功表达并分泌出AiiA蛋白。抗病性分析表明,分泌表达的AiiA蛋白能有效抑制胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)的致病性。AiiA蛋白在毕赤酵母中的分泌表达,拓宽了AiiA蛋白的获取途径,为AiiA蛋白的产业化提供理论依据。密码子优化为今后改造AiiA蛋白,提高AiiA蛋白的表达效率提供了新的思路。
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| 关 键 词： | N-酰基高丝氨酸内酯酶蛋白(AiiA) 分泌表达 密码子优化 |
Optimized Expression of N-acylhomoserine Lactonase Gene (aiiA) from Bacillus thuringiensis in Pichia pastoris |
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| JIAN Si-Mei,HE Jing-Jing,MAO Hui-Min,YANG Mei.Optimized Expression of N-acylhomoserine Lactonase Gene (aiiA) from Bacillus thuringiensis in Pichia pastoris[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2014(11). |
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| Authors: | JIAN Si-Mei HE Jing-Jing MAO Hui-Min YANG Mei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | N-acylhomoserine lactonase (AiiA) Secretory expression Codon optimization |
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