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猪圆环病毒2型/3型双重荧光定量PCR检测方法
引用本文:王林青,樊霖,赵宇,田润博,崔建涛,韩昊莹,赵丽,陈红英.猪圆环病毒2型/3型双重荧光定量PCR检测方法[J].安徽农业大学学报,2021,48(4):595-599.
作者姓名:王林青  樊霖  赵宇  田润博  崔建涛  韩昊莹  赵丽  陈红英
作者单位:郑州师范学院分子生物学郑州市重点实验室,郑州450044;河南农业大学动物医学院,郑州450002;河南农业大学动物医学院,郑州450002;河南牧业经济学院动物医药学院,郑州450008;河南农业大学动物医学院,郑州450002;郑州市猪重大疫病防控重点实验室,郑州450002
基金项目:河南省高校科技创新团队支持计划(19IRTSTHN007), 河南省科技开放合作项目(182106000048), 河南省高等学校青年骨干教师培养计划(2018GGJS161)和河南省科技攻关项目(192102110184)共同资助。
摘    要:为了能够同时快速地检测和鉴别猪圆环病毒2型和3型(PCV2和PCV3),参考GenBank中已发表的PCV2和PCV3基因组序列,针对其保守区分别设计了2对特异性引物,经优化反应体系和条件,建立了能快速检测和鉴别PCV2/PCV3双重荧光定量PCR方法.结果 表明,PCV2和PCV3的R2分别为0.999、0.9993,E值分别为3.5731、3.3734.该方法能同时特异地检测PCV2和PCV3,而对其他5种猪病原均未检测到荧光信号;PCV2和PCV3的最低检测值分别为41.1 copies·μL-1、27.0 copies·μL-1;批内和批间变异系数均小于1%.临床样本检测结果显示,PCV2和PCV3的阳性率分别为62.12%(41/66)、48.48%(32/66),二者混合感染的阳性率为46.96%(31/66).表明该方法具有敏感、特异和可靠等特点,该方法为PCV2和PCV3单独或者混合感染的早期诊断、定量检测及其流行病学调查提供了可行的技术支持.

关 键 词:猪圆环病毒  PCV2和PCV3  双重荧光定量PCR  检测

Duplex real-time fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus Types 2 and 3
WANG Linqing,FAN Lin,ZHAO Yu,TIAN Runbo,CUI Jiantao,HAN Haoying,ZHAO Li,CHEN Hongying.Duplex real-time fluorescence quantitative PCR method for detection of porcine circovirus Types 2 and 3[J].Journal of Anhui Agricultural University,2021,48(4):595-599.
Authors:WANG Linqing  FAN Lin  ZHAO Yu  TIAN Runbo  CUI Jiantao  HAN Haoying  ZHAO Li  CHEN Hongying
Institution:Zhengzhou Key Laboratory of Molecular Biology, Zhengzhou Normal University, Zhengzhou 450044; College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002;College of Veterinary Medicine, Henan University of Animal Husbandry and Economy, Zhengzhou 450008; College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002; Zhengzhou Key Laboratory of Prevention and Control of Major Epidemics of Pigs, Zhengzhou 450002
Abstract:
Keywords:porcine circovirus  PCV2 and PCV3  duplex fluorescent quantitative PCR  detection
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