| 大麦条纹花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 王立杉,王海洋,钱云开,高 飞,吴 曦,王秀平,柳吉芹.大麦条纹花叶病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].植物保护,2021,47(5):240-244. |
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| 作者姓名： | 王立杉 王海洋 钱云开 高 飞 吴 曦 王秀平 柳吉芹 |
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| 作者单位： | 1. 河北科技师范学院, 秦皇岛 066004; 2. 秦皇岛海关技术中心, 秦皇岛 066004 |
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| 基金项目： | 海关总署科研项目（2020HK229） |
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| 摘 要： | 大麦条纹花叶病毒Barley stripe mosaic virus（BSMV）是我国进境植物检疫性有害生物。为提高大麦条纹花叶病毒检测的灵敏度和特异性,缩短检测周期,根据该病毒不同分离株外壳蛋白（coat protein, CP）基因的保守序列设计特异性的引物和探针,建立了BSMV的实时荧光RT-PCR检测方法。结果表明,本检测方法特异性强,对南方菜豆花叶病毒Southern bean mosaic virus（SBMV）、小麦线条花叶病毒Wheat streak mosaic virus（WSMV）、玉米褪绿斑驳病毒Maize chlorotic mottle virus（MCMV）、烟草环斑病毒Tobacco ringspot virus（TRSV）、菜豆荚斑驳病毒Bean pod mottle virus（BPMV）和番茄环斑病毒Tomato ringspot virus（ToRSV）6种病毒均无交叉扩增;且检测方法灵敏度高,对RNA模板的最低检测限达到5×10-4 ng/μL,与双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS-ELISA）和普通RT-PCR相比,本方法的灵敏度分别提高了10倍和100倍。此外,我们利用该方法对12批进口大麦进行检测,发现6批大麦中检出大麦条纹花叶病毒,占比约50%。总之,本研究建立的荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强等优点,适合于BSMV的快速检测。
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| 关 键 词： | 大麦条纹花叶病毒 荧光定量PCR 大麦 RT-PCR ELISA |
| 收稿时间： | 2020/7/23 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/9/2 0:00:00 |
Establishment and application of fluorescence quantitative PCR detection method for Barley stripe mosaic virus |
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| WANG Lishan,WANG Haiyang,QIAN Yunkai,GAO Fei,WU Xi,WANG Xiuping,LIU Jiqin.Establishment and application of fluorescence quantitative PCR detection method for Barley stripe mosaic virus[J].Plant Protection,2021,47(5):240-244. |
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| Authors: | WANG Lishan WANG Haiyang QIAN Yunkai GAO Fei WU Xi WANG Xiuping LIU Jiqin |
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| Institution: | 1. Hebei Normal University of Science and Technology, Qinhuangdao 066004, China; 2. Qinhuangdao Custom Technical Center, Qinhuangdao 066004, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Barley stripe mosaic virus fluorescence quantitative PCR barley RT-PCR ELISA |
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