| 杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的克隆及盐胁迫下的表达分析 |
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| 引用本文： | 韩冬梅,柴晓杰,王逸云,刘世才,岳文静.杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的克隆及盐胁迫下的表达分析[J].核农学报,2014(10). |
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| 作者姓名： | 韩冬梅 柴晓杰 王逸云 刘世才 岳文静 |
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| 作者单位： | 大连海洋大学/农业部北方海水增养殖重点实验室/辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30972240,31472260);辽宁省教育厅科学技术研究项目(2008T023) |
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| 摘 要： | 为了研究磷脂酶C基因的结构与功能,采用RT-PCR和RACE技术从盐藻中克隆出了一种磷脂酶C基因(GenBank Accession No.KF573428),命名为DsPLC,并对其进行了生物信息学分析和盐胁迫条件下的表达分析。结果表明,DsPLC的cDNA全长2 628 bp,开放阅读框1 782 bp,编码593个氨基酸。该蛋白质为亲水性稳定蛋白,没有信号肽,也没有跨膜区域,是一种非跨膜蛋白,存在多个潜在的磷酸化位点,二级结构的主要元件为无规卷曲和α-螺旋。进一步的进化分析结果表明,盐藻与衣藻、团藻的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,正常情况下DsPLC的表达量很低,当受到高盐胁迫时表达量急剧升高,且在胁迫4 h时表达量达到最高,是对照组的10倍左右,差异极显著(P0.01),表明DsPLC可能在盐藻抵御外界盐胁迫的过程中起重要作用。这些研究结果为进一步阐明DsPLC的功能及其作用机制奠定了分子基础。
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| 关 键 词： | 杜氏盐藻 磷脂酶C 全长cDNA 生物信息学分析 实时荧光定量PCR |
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