| 玉米HVA22基因启动子的克隆与功能验证 |
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| 引用本文： | 陈佳佳,牟巍,周树峰,李晚忱,付凤玲.玉米HVA22基因启动子的克隆与功能验证[J].核农学报,2014(4). |
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| 作者姓名： | 陈佳佳 牟巍 周树峰 李晚忱 付凤玲 |
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| 作者单位： | 四川农业大学玉米研究所; |
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| 基金项目： | 国家转基因重大科技专项(2013ZX08003-005) |
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| 摘 要： | 利用转基因技术转化利用外源抗性基因,可提高玉米对非生物逆境的抵抗能力,改良其在不良环境下的稳产性。但是,在过去的研究中,大多采用组成型启动子启动外源抗逆基因过量表达,虽然可以改良转基因株系的抗逆性,但其生长发育受到不同程度抑制,适应性代价较大。用非生物逆境诱导启动子,可培育出只在逆境胁迫下表达的转基因抗逆品种,避免正常条件下抗逆基因过量表达的不良影响。本研究以水稻HVA22蛋白质的氨基酸序列为探针,搜索玉米基因组同源mRNA序列HVA22,用PlantCARE软件分析并同源克隆其上游启动子序列,实时荧光定量PCR验证HVA22基因在非生物逆境胁迫下的差异表达,构建HVA22基因启动子HVA22s启动GUS基因的表达载体,基因枪法转化玉米愈伤组织,GUS染色检测启动活性。结果表明,玉米HVA22s启动子长度1478 bp,含有多种与非生物逆境应答相关的调控元件。HVA22基因在高温胁迫,以及脱落酸和乙烯诱导下上调表达。用HVA22s启动GUS基因转化的玉米愈伤组织,在脱落酸诱导、甘露醇模拟高渗处理、低温和高盐胁迫条件下,GUS染色均可显现靛蓝色斑点,说明HVA22s启动子确有非生物逆境启动功能,进一步验证其启动活性后可运用于玉米抗逆转基因研究。
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| 关 键 词： | 非生物胁迫 功能 诱导表达 玉米 启动子 |
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