| HCV NS5B蛋白表达、纯化及活性测定 |
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| 引用本文： | 张秀杰,李莉,欧阳红生.HCV NS5B蛋白表达、纯化及活性测定[J].吉林农业大学学报,2008,30(2):154-156. |
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| 作者姓名： | 张秀杰 李莉 欧阳红生 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081
2. 吉林大学农学部畜牧兽医学院,长春,130062 |
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| 摘 要： | 以HCV cDNA为模板,设计特异性扩增引物,PCR得到编码NS5B的基因,与PET-21a质粒连接,构建重组质粒。重组质粒转化入大肠杆菌Rosetta菌株,加入IPTG(终浓度0.5 mmol/L),30℃、5 h诱导表达。连续通过Ni-NTA柱、SP阳离子交换柱纯化蛋白,1 L菌液可得到1.2 mg蛋白。体外活性测定结果表明,所得蛋白具有RdRp功能,酶对底物UTP的Km值为2.06μmol/L。
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| 关 键 词： | HCV NS5B蛋白 表达 纯化 活性测定 |
| 文章编号： | 1000-5684(2008)02-0001-03 |
| 修稿时间： | 2007年3月20日 |
Expression, Purification and Activity Assay of HCV NS5B |
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| ZHANG Xiu-jie,LI Li,OUYANG Hong-sheng.Expression, Purification and Activity Assay of HCV NS5B[J].Journal of Jilin Agricultural University,2008,30(2):154-156. |
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| Authors: | ZHANG Xiu-jie LI Li OUYANG Hong-sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HCV NS5B expression purification activity assay |
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