| 嗜水气单胞菌HEC毒素基因的克隆及酶谱分析 |
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| 引用本文： | 陈怀青,袁世山.嗜水气单胞菌HEC毒素基因的克隆及酶谱分析[J].中国兽医学报,1997,17(4):339-343. |
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| 作者姓名： | 陈怀青 袁世山 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家教委高校博士点科研专项基金及兽医生物技术国家重点实验室开放基金资助项目 |
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| 摘 要： | 嗜水气单胞菌ＨＥＣ毒素是该菌重要的致病因子和保护性抗原。为了解其分子生物学特性，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取了嗜水气单胞菌Ｊ－１株的染色体，经ＥｃｏＲＩ酶切、琼脂糖凝胶电泳后作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ，用ＤＩＧ标记的ＨＥＣ毒素探针检测，其５．０ｋｂ的酶切片段呈阳性。回收该片段，与ｐＵＣ１９相连，转化大肠杆菌ＪＭ１０９。提取Ｘ－ｇａｌ平板上白色菌落的质粒，经大小比较、ＥｃｏＲＩ酶切分析及ＤＩＧ标记ＨＥＣ毒素核酸探针斑点杂交鉴定，获得ｐＨＥＣ１１等含５．０ｋｂ目的ＤＮＡ片段的重组质粒。ｐＨＥＣ１１质粒经酶切、电泳，证实目的ＤＮＡ片段中含有ＢａｍＨＩ、ＳｍａⅠ、ＰｓｔⅠ及ＰｖｕⅡ等酶切位点，并绘制了其物理图谱。同时还构建了若干亚克隆，为研制嗜水气单胞菌基因工程苗提供了目的基因片段。
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| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 HEC毒素 基因 分子克隆 物理图谱 |
Cloning and Mapping of the Aeromonas hydrophila HEC Toxin Gene Determinant |
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| Chen Huaiqing,Lu Chengping.Cloning and Mapping of the Aeromonas hydrophila HEC Toxin Gene Determinant[J].Chinese Journal of Veterinary Science,1997,17(4):339-343. |
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| Authors: | Chen Huaiqing Lu Chengping |
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