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Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立
引用本文:黄显明,张小飞,李春芬,廖俊伟,毛火云.Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立[J].中国兽医科技,2008,38(1):25-28.
作者姓名:黄显明  张小飞  李春芬  廖俊伟  毛火云
作者单位:[1]安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036 [2]江苏省农业科学院兽医研究所,江苏南京210014 [3]南京天邦生物科技有限公司,江苏南京211102
摘    要:根据GenBank中登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)A66株的RNA聚合酶基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合DHV-I快速检测的逆转录套式PCR方法(RT-nested-PCR),采用该方法对DHV-Ⅰ A66弱毒株和R85952强毒株进行了检测。结果显示,均能扩增到304bp的条带,而正常鸭胚、健康鸭肝组织、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性腔上囊病病毒、减蛋综合征病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌和鸭源多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性。该方法第1次扩增的敏感性是100Pg,第2次扩增的敏感性是1fg,第2次比第1次扩增的敏感性高10^6倍。表明,所建立的逆转录套式PCR方法可用于鸭病毒性肝炎(DVH)的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等。

关 键 词:Ⅰ型鸭肝炎病毒  逆转录套式PCR  检测
文章编号:1673-4696(2008)01-0025-04
收稿时间:2007-09-21
修稿时间:2007-11-09
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