| 仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 何钢,朱丽芳,梁文斌,刘贤桂,张吉顺,荣广天,文梦维.仙茅根茎DNA的提取及其ISSR-PCR反应体系的优化[J].经济林研究,2016(1). |
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| 作者姓名： | 何钢 朱丽芳 梁文斌 刘贤桂 张吉顺 荣广天 文梦维 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学生命科学与技术学院,湖南长沙,410004 |
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| 基金项目： | 国家林业公益性行业科技专项项目“仙茅、鸡血藤资源培育及林下种植技术研究”(201304807). |
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| 摘 要： | 为了改进仙茅基因组DNA的提取方法,从而为其遗传多样性研究提供参考依据,以仙茅根茎为材料,采用CTAB法探讨了仙茅根茎DNA大量提取中CTAB浓度、PVP用量及Na Cl浓度对其DNA质量的影响情况。结果表明,仙茅根茎DNA的大量提取方法的最优组合为:CTAB的浓度为2%,PVP的加入量为0.20 g,Na Cl的浓度为4 mol/L。为了得到仙茅的最佳ISSR-PCR反应体系,以(CT)8 RG为引物,采用单因素实验与正交实验相结合的方法,得到的最优反应体系(25μL)为:1×PCR Buffer,模板DNA浓度为50 ng,Mg2+浓度为2.50 mmol/L,d NTPs浓度为0.20 mmol/L,引物浓度为0.40μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度为1.50 U。
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| 关 键 词： | 仙茅 根茎 DNA提取 ISSR 反应体系 |
DNA extraction and optimization of ISSR-PCR reaction systems for tubers in Curculigo orchioides |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Curculigo orchioides tuber DNA extraction ISSR reaction system |
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