| 一种新的猪α-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达 |
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| 引用本文： | 曹瑞兵,张素芳,蔡梅红,王艳,陈德胜,陈溥言.一种新的猪α-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达[J].农业生物技术学报,2004,12(3):278-282. |
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| 作者姓名： | 曹瑞兵 张素芳 蔡梅红 王艳 陈德胜 陈溥言 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 |
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| 摘 要： | 提取经新城疫病毒诱导培养的猪外周血白细胞总RNA,RT-PCR扩增出猪α-干扰素基因并克隆到T载体.测序结果表明,扩增片段含有信号肽的猪α-干扰素完整基因,与GenBank上登录的猪α1-干扰素基因同源性为97.2%.亚克隆猪α-干扰素成熟蛋白编码基因并对其5'段前1个稀有密码子进行大肠杆菌(Escherchia coli)偏嗜性改造.构建了猪α-干扰素原核单纯表达载体pCIFNA,实现了猪α-干扰素在大肠杆菌中的表达,表达产物约占菌体总蛋白的15.6%.表达产物以包涵体形式存在,用含6 mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSH-GSSG复性液复性处理,复性后的表达产物经凝胶层析纯化后,细胞病变抑制法测定结果表明,重组猪α-干扰素具有较高抗病毒活性,约为1.66x106U/mg.
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| 关 键 词： | 猪 α-干扰素 基因 克隆 大肠杆菌 表达 |
| 修稿时间： | 2003年5月29日 |
Molecular Cloning of a Novel Porcine Interferon-α and Its Expression in Escherichia coli |
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