| 乙型脑炎病毒NS1’蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响 |
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| 引用本文： | 郭亦非,郑浩,郑旭晨,童武,刘飞,梁超,单同领,于海,童光志.乙型脑炎病毒NS1’蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响[J].中国动物传染病学报,2014(2):27-31. |
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| 作者姓名： | 郭亦非 郑浩 郑旭晨 童武 刘飞 梁超 单同领 于海 童光志 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然基金青年基金项目(31201917);上海市自然基金项目(11ZR1446200) |
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| 摘 要： | 通过分析乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中核糖体移码序列,在对NS2A基因实施同义突变基础上,设计2组引物,通过PCR突变方法,依次删除移码后NS1’基因开放阅读框的终止密码子,并将突变片段替换JEV感染性克隆pJEHEN中相应片段,获得了2株突变全长克隆。经体外转录合成RNA,再以RNA转染细胞,拯救出两株突变病毒vJET1和vJET2。通过RT-PCR扩增突变病毒中含突变位点的基因组片段,测序证实了vJET1基因组3690位核苷酸存在由T向A的突变,vJET2基因组3690位和3819位核苷酸均存在由T向A的突变。将vJET1和vJET2感染Vero细胞后,Western blot检测显示,两株突变病毒表达的NS1’蛋白均出现延长现象。生长曲线显示,与亲本病毒vTHen相比,突变病毒增殖速度均出现下降。动物实验显示,与vTHen相比,vJET1和vJET2对小鼠的神经毒力与神经侵袭力也出现下降。上述结果表明,NS1’编码框的延伸降低病毒在体外培养细胞上的增值速度,也减弱了病毒对小鼠的毒力。
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| 关 键 词： | 乙型脑炎病毒 NS1’ 突变 毒力 |
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