高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒SHxx13/2013株的分离与鉴定 |
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引用本文: | 程群,姜一峰,虞凌雪,王康,杨莘,李丽薇,高飞,于海,童武,童光志,周艳君.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒SHxx13/2013株的分离与鉴定[J].中国动物传染病学报,2014(2):32-38. |
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作者姓名: | 程群 姜一峰 虞凌雪 王康 杨莘 李丽薇 高飞 于海 童武 童光志 周艳君 |
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作者单位: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31100121);863计划项目(2011AA10A208-2);上海市重点基础研究项目(11JC1415200);国家生猪现代产业技术体系建设项目(NYCYTX-009);上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字(2012)第2-5号) |
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摘 要: | 2013年初上海某猪场保育猪群中出现高热、呼吸障碍等临床表现,导致大部分发病猪死亡,为了确定此次猪群中爆发疫病的病原,本研究从发病猪群中随机采集了15份血液样品,利用RT-PCR方法对本次疫病病原进行了检测。结果显示,有11份临床样品呈现猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强阳性,且与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)对照大小相一致。随后从阳性样品中选取SHxx13/2013在Marc-145细胞中进行病毒的分离与鉴定,结果显示SHxx13/2013在细胞接种后第1代即出现明显的细胞效应(cytopathic effect,CPE),其病变特征与高致病性PRRSV强毒HuN4株一致。对SHxx13/2013第5代细胞分离毒进行RT-PCR和IFA等特异性鉴定,结果显示该毒株为PRRSV分离株,其蚀斑形态和生长特性与强毒HuN4株相似。分段克隆该毒株全长基因进行测序和序列分析,结果显示,新分离的流行毒SHxx13/2013株全长基因组为15 319 bp,其Nsp2基因特征与HP-PRRSV一致,在第482位和第534~562位发生两处共30个氨基酸的不连续缺失,且该毒株与高致病性PRRSV代表毒株HuN4亲缘关系较近,全长基因的核苷酸同源性为99.6%。本研究结果表明新分离的SHxx13/2013株属于高致病性PRRSV分离株,据此我们推测今年年初上海某猪场爆发的疫情主要是由HP-PRRSV感染所致。
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关 键 词: | 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 PCR 分离 鉴定 |
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