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| H9和H10亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立 | |
| 作者单位： | ;1.广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室 |
| 摘 要： | 根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的三重RT-PCR检测方法。特异性实验结果表明,该方法可以特异性地扩增出H9、H10亚型AIV及M基因对应大小的目的条带,而对其余亚型AIV仅M基因出现特异性条带,其它禽病病原体均未扩增出任何特异性条带。敏感性实验结果表明,该方法对H9、H10亚型HA基因及M基因质粒的扩增下限均为5×104拷贝/μL。此外,该方法对临床样品的检测结果与病毒分离及测序结果完全一致。 |
| 关 键 词： | 禽流感病毒 H9亚型 H10亚型 M基因 三重RT-PCR 检测 |
Establishment of Triplex RT-PCR Assay for Detection of AIV H9 Subtype and H10 Subtype |
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