| C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位对PCV2 VLPs稳定性的影响 |
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| 引用本文： | 刘项羽,聂庆庆,杜恩岐.C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位对PCV2 VLPs稳定性的影响[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2022,50(11):9-16. |
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| 作者姓名： | 刘项羽 聂庆庆 杜恩岐 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院 |
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| 基金项目： | “十三五”涉农专项（2016YFD0500306）；国家自然科学基金项目（31572556） |
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| 摘 要： | 【目的】利用大肠杆菌原核表达系统表达猪圆环病毒2型Cap蛋白及在其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap嵌合蛋白，对Cap蛋白形成的病毒样颗粒（VLPs）的稳定性、免疫原性以及C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位VLPs的热稳定性进行研究，为猪圆环病毒2型(PCV2)VLPs疫苗的高效制备及基于Cap VLPs纳米骨架展示技术嵌合疫苗的开发奠定基础。【方法】采用分子生物学方法合成PCV2b型强毒株ZJ的cap基因，在其C-端插入PRRSV T细胞抗原表位T1、T2、T3、T4、T5,构建cap-T1～cap-T5基因；将cap及cap-T1～cap-T5基因与pET28a表达载体连接，构建重组表达载体，转染大肠杆菌ClearColiTMBL21(DE3)进行诱导表达，并对表达产物的热稳定性及免疫效果进行检测。【结果】实现了Cap蛋白及其C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的Cap-T1、Cap-T2、Cap-T3、Cap-T4和Cap-T5嵌合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达，并成功观察到了VLPs；表达产物热稳定性分析显示，在60 ℃处理30 min条件下，Cap VLPs保持稳定，而C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位的VLPs热稳定性大幅下降；小鼠免疫效果检测显示，Cap VLPs诱导产生了高水平特异性抗体，其中VLPs+佐剂S350组效果最好。【结论】利用大肠杆菌表达系统表达的PCV2 Cap蛋白可高效自组装成耐热和高免疫原性的VLPs，但在Cap蛋白C-端嵌合PRRSV T细胞抗原表位后的嵌合VLPs组装效果和稳定性急剧下降，提示PCV2 VLPs作为纳米骨架用于传染病疫苗研发仍有较大局限性。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒 Cap蛋白 C-端嵌合 病毒样颗粒 热稳定性 免疫原性 |
| 收稿时间： | 2021/11/18 0:00:00 |
Effect of C-terminal chimeric PRRSV T cell epitopes on stability of PCV2 VLPs |
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| LIU Xiangyu,NIE Qingqing,DU Enqi,et al.Effect of C-terminal chimeric PRRSV T cell epitopes on stability of PCV2 VLPs[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2022,50(11):9-16. |
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| Authors: | LIU Xiangyu NIE Qingqing DU Enqi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine circovirus Cap protein C-terminal chimeric VLPs thermostable immunogenicity |
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