HSSP基因植物表达载体构建及其对大豆的遗传转化 |
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引用本文: | 李兴龙,霍建玲,庞添,柏锡.HSSP基因植物表达载体构建及其对大豆的遗传转化[J].大豆科学,2016(1):171-175. |
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作者姓名: | 李兴龙 霍建玲 庞添 柏锡 |
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作者单位: | 东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150036 |
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基金项目: | 转基因生物新品种培育重大专项 |
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摘 要: | 大豆中含硫氨基酸匮乏,限制了大豆的营养价值和商业价值。为了提高大豆的含硫氨基酸含量,利用人工设计合成的高含硫氨基酸贮藏蛋白基因(HSSP)转化大豆。以载体p TF101.1为骨架,构建植物表达载体p TFGS,利用农杆菌介导法转化大豆品种东农50,经PCR及试纸条检测,获得转基因大豆16株,基因的转化效率为1.94%。对转基因大豆株系GSDL5进行组织特异性分析,结果表明,HSSP基因在种子中超量表达,而在其它组织部位仅有微量表达。采用接头PCR方法对株系GSDL5基因组插入位点侧翼序列进行克隆,获得与大豆基因组序列匹配的436 bp侧翼序列,HSSP基因插入2号染色体基因的非编码区。经研究,获得了遗传背景明确的,仅在大豆种子中超量表达HSSP的转基因株系GSDL5。
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关 键 词: | 大豆 含硫氨基酸 农杆菌介导遗传转化 |
High Efficient Plant Expression Vector with HSSP Gene and Transformation into Soybean |
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Abstract: | |
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Keywords: | Soybean Sulfur-containing amino acids Agrobacterium-mediated transformation |
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