乳糖诱导海藻糖合成酶基因工程菌条件优化 |
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引用本文: | 尚宏丽,李敏.乳糖诱导海藻糖合成酶基因工程菌条件优化[J].饲料研究,2015(7):57-60,64. |
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作者姓名: | 尚宏丽 李敏 |
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作者单位: | 辽宁省肉类加工与质量安全控制工程技术研究中心;辽宁医学院 |
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基金项目: | 校企课题(LYHX20120630);辽宁省大学生创业训练项目(201310160033) |
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摘 要: | 研究乳糖代替异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导海藻糖合成酶(Tres)在基因工程菌p ET-30a(+)Tres/BL21中的表达,分别对用乳糖作为诱导剂时的诱导时机、乳糖浓度、诱导持续时间和添加方式,确定了乳糖诱导的最佳条件。经过试验验证,工程菌对数生长中期,OD600 nm约为0.8时,分批次添加终浓度为0.5 mmol/L的乳糖于25℃条件下,诱导5 h,乳糖诱导的蛋白表达量达到最高值。通过试验证明,乳糖可以作为一种很好的诱导剂代替IPTG诱导p ET-30a(+)Tres/BL21中重组产物海藻糖合成酶,为今后海藻糖合成酶生产开发利用提供试验基础。
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关 键 词: | 海藻糖合成酶 诱导 乳糖 |
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