| 闽楠、红楠AFLP反应体系建立 |
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| 引用本文： | 田晓俊,温强,汪信东,杨青,江香梅.闽楠、红楠AFLP反应体系建立[J].林业科技开发,2009,23(3). |
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| 作者姓名： | 田晓俊 温强 汪信东 杨青 江香梅 |
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| 作者单位： | 1. 江西省林业科学院,南昌,330032
2. 江西农业大学林学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目"闽楠、红楠保护生物学研究" |
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| 摘 要： | 以闽楠、红楠总基因组DNA为模板,对AFLP分析各环节的条件进行了优化和筛选,建立了适合于闽楠、红楠AFLP分析的最佳反应体系.其中:酶切反应条件为在20μL反应体系中,加入模板DNA 150 ng,Buffer22μL,BSA 0.2μL,EcoRI 3U,Msel 2U,37℃酶切4 h,65℃变性10 min,4℃保存;连接反应条件为将酶切产物中加入5μL连接体系(包括T4 Buffer 2.5μL,EcoRI接头5 pmol,MseI接头50 pmol,T4连接酶1U),16℃连接过夜.预扩增反应条件为在20μL体系中,加入稀释25倍的连接产物5μL,Mg2+(25 mM/L)1.6μL,dNTP(2 mM/L)2 μL,预扩增引物E00、M00各30 ng,Taq酶1U.选择性扩增反应条件为:在20μL体系中,加入稀释100倍的预扩增产物5μL,Mg2+ 1.2μL,dNTP 2μL,选择性扩增引物(E+3/M+3)60 ng,Taq酶1U.本实验结果为闽楠、红楠AFLP分析打下了良好的实验基础.
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| 关 键 词： | 阈楠 红楠 反应体系 优化 |
Establishment and Optimization of AFLP Reaction for Phoebe bournei and Machilus thunbergii |
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| TIAN Xiao-jun,WEN Qiang,WANG Xin-dong,YANG Qing,JIANG Xiang-mei.Establishment and Optimization of AFLP Reaction for Phoebe bournei and Machilus thunbergii[J].China Forestry Science and Technology,2009,23(3). |
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| Authors: | TIAN Xiao-jun WEN Qiang WANG Xin-dong YANG Qing JIANG Xiang-mei |
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| Institution: | TIAN Xiao-jun,WEN Qiang,WANG Xin-dong,YANG Qing,JIANG Xiang-mei Forestry Academy of Jiangxi Procince,330032 Nanchang,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | AFLP |
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