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猪瘟病毒结构蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立及评价
引用本文:袁 莉,杨顺利,尚佑军,贾怀杰,景志忠,刘湘涛,蔡建平,尹双辉.猪瘟病毒结构蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立及评价[J].西北农业学报,2018,27(9):1273-1279.
作者姓名:袁 莉  杨顺利  尚佑军  贾怀杰  景志忠  刘湘涛  蔡建平  尹双辉
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室
基金项目:中国农业科学院农业科技创新工程 (CAAS-ASTIP-2014-LVRI-09)。
摘    要:通过研究猪瘟(CSF)疫苗免疫猪抗结构蛋白E2、E0和C抗体的产生规律,为临床制定合理的CSF疫苗免疫程序提供参考。利用间接ELISA方法检测CSF疫苗免疫猪过程中,抗E2抗原血清抗体的产生特征;分别以重组猪瘟病毒(CSFV)结构蛋白E0和C为抗原,建立检测血清抗体的间接ELISA方法,评价其敏感性和特异性,并检测疫苗免疫过程中抗E0和C蛋白抗体的消长规律。结果显示:CSFV-E0和CSFV-C间接ELISA抗体检测方法的抗原最佳包被质量浓度分别为2.09和1.59μg/mL,待检血清样本最适稀释度分别为1∶60和1∶80,酶标二抗稀释度分别为1∶100和1∶350,2种ELISA方法与常见猪病原的阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性。CSF疫苗免疫后第7天即可检测到抗E2、E0和C蛋白的抗体,其中抗E2和E0的抗体在免疫后第21天达到最高水平,E2抗体滴度先上升后下降,E0抗体在免疫后第21天开始下降并最终趋于稳定;C蛋白抗体在免疫后第7天出现,随后开始下降,在第28天转为阴性。结果表明,利用重组抗原建立的CSFV血清抗体ELISA检测方法,可以用于评价CSF疫苗免疫后血清中针对3种结构蛋白的抗体消长特点,从而为临床猪瘟疫苗免疫程序的制定提供参考。

关 键 词:CSFV  结构蛋白  疫苗免疫  抗体检测  间接ELISA

Establishment and Evaluation of the Indirect ELISA Methods for the Structural Proteins of Classical Swine Fever Virus Vaccine Strain
YUAN Li,YANG Shunli,SHANG Youjun,JIA Huaijie,JING Zhizhong,LIU Xiangtao,CAI Jianping and YIN Shuanghui.Establishment and Evaluation of the Indirect ELISA Methods for the Structural Proteins of Classical Swine Fever Virus Vaccine Strain[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2018,27(9):1273-1279.
Authors:YUAN Li  YANG Shunli  SHANG Youjun  JIA Huaijie  JING Zhizhong  LIU Xiangtao  CAI Jianping and YIN Shuanghui
Abstract:
Keywords:CSFV  Structural proteins  Vaccination  Antibody detection  Indirect ELISA
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