| 自动化工作站批量提取烤后烟叶 DNA 方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 余婧,赵杰宏,邹颉,付强,张孝廉.自动化工作站批量提取烤后烟叶 DNA 方法的建立与应用[J].贵州农业科学,2015(5). |
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| 作者姓名： | 余婧 赵杰宏 邹颉 付强 张孝廉 |
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| 作者单位： | 1. 贵州省烟草科学研究院，烟草行业烟草分子遗传重点实验室，贵州 贵阳 550081; 贵州烟叶复烤有限责任公司铜仁复烤厂，贵州 铜仁 554300
2. 贵州省烟草科学研究院，烟草行业烟草分子遗传重点实验室，贵州 贵阳 550081 |
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| 基金项目： | 贵州省科技支撑计划农业攻关项目“转基因烤烟检测标准物质和检测技术研究及应用” |
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| 摘 要： | 为建立高效、快速、准确的烤后烟叶 DNA 提取方法，采用 BioMek NXP自动化工作站与国产DNA 磁珠法提取试剂盒相结合，建立了自动化批量提取烤后烟叶基因组 DNA（作为 PCR 模板）的方法，以获取高质量的烤后烟叶 DNA 满足 PCR 检测需求。结果表明：水浴时间30 min、样本量70～80 mg、80％乙醇洗涤4次能获得 OD260／OD280为1．7～1．9，浓度大于100 ng／μL 的烤后烟叶基因组 DNA，合格率达95．8％。经 PCR 定性扩增烟草硝酸还原酶基因（NR），该方法所提的 DNA 溶液中无 PCR 反应抑制物残留，可直接用于 PCR 定性分析。烟叶粉末经预处理，取上清液上机后约110 min 可完成96份样品的 DNA 提取工作。
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| 关 键 词： | 自动化工作站 烤后烟叶 DNA 提取方法 |
Establ ishment and Appl ication of Automation Workstation in DNA Batch Extraction from Flue-cured Tobacco |
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| YU Jing,ZHAO Jiehong,ZOU Jie,FU Qiang,ZHANG Xiaolian.Establ ishment and Appl ication of Automation Workstation in DNA Batch Extraction from Flue-cured Tobacco[J].Guizhou Agricultural Sciences,2015(5). |
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| Authors: | YU Jing ZHAO Jiehong ZOU Jie FU Qiang ZHANG Xiaolian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | automation workstation flue-cured tobacco DNA extraction method |
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