| 稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 牛军伟,郭龙军,谷伟红,黄明明,李忍,骆晓蕾,王玉娥.稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立[J].中国预防兽医学报,2015(3):163-166. |
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| 作者姓名： | 牛军伟 郭龙军 谷伟红 黄明明 李忍 骆晓蕾 王玉娥 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31372416) |
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| 摘 要： | 为构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)受体CD163的HEK293细胞系,本研究采用RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞(PAM)总RNA中扩增CD163基因并将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1(+)中,构建重组质粒pc DNA-CD163。将该重组质粒转染HEK293细胞,并利用G418筛选、纯化,获得了稳定表达CD163受体蛋白的HEK293CD163细胞系。RT-PCR、流式细胞术及western blot检测结果表明,该细胞系在传代至15代后,CD163在HEK293细胞中仍然能够稳定表达。在该细胞系中接种PRRSV后进行间接免疫荧光及噬斑试验检测表明,病毒能够通过CD163感染HEK293CD163细胞并在其中增殖。该细胞系的建立为进一步研究PRRSV的侵入细胞和致病机制提供了病毒在体外增殖的易感细胞系。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合症病毒 CD163 稳定表达 HEK293细胞系 |
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