| 红鳍东方鲀Sirt1基因的克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 张 伟,杨志军,王 群.红鳍东方鲀Sirt1基因的克隆及其原核表达[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2012,40(8):54-59. |
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| 作者姓名： | 张 伟 杨志军 王 群 |
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| 作者单位： | 华东师范大学 生命科学学院；东京大学 农学部 水产化学研究室；新乡医学院 基础医学院;新乡医学院 基础医学院;华东师范大学 生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家留学基金委“国家建设高水平大学公派研究生项目”（2008614045） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆红鳍东方鲀Sirtuin1(Sirt1)基因编码阅读框(ORF),并对其进行原核表达。【方法】采集红鳍东方鲀脂肪组织,提取其总RNA,采用RT-PCR方法扩增和克隆红鳍东方鲀Sirt1基因的ORF,构建其原核表达载体pET32a/Sirt1,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。【结果】红鳍东方鲀Sirt1基因ORF区由2 070个核苷酸组成,编码689个氨基酸。根据红鳍东方鲀Sirt1ORF核苷酸序列推测的氨基酸序列与其他物种进行比对,发现其与罗非鱼(Oreochromis niloticus)、非洲齿鲤(Nothobranchius furzeri)、科恩氏假鳃鳉(Nothobranchius kuhntae)、斑马鱼(Danio rerio)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)的同源性分别为82%,82%,81%,66%,72%和69%;成功构建了重组质粒pET32a/Sirt1,用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在约105ku处有特异性的蛋白条带出现。【结论】克隆得到红鳍东方鲀Sirt1基因的ORF序列,并成功对其进行了原核表达。
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| 关 键 词： | 红鳍东方鲀 Sirt1 基因表达 cDNA克隆 原核表达 |
| 收稿时间： | 2012/4/10 0:00:00 |
Cloning and prokaryotic expression of Sirt1 gene from torafugu Takifugu rubripes |
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| Institution: | ZHANG Wei1,2,3,YANG Zhi-jun3,WANG Qun1,WATABE Shugo2(1 School of Life Science,East China Normal University,Shanghai,200062,China;2 Department of Aquatic Bioscience,Graduate School of Agricultural and Life Sciences,The University of Tokyo,Tokyo,113-8657,Japan; 3 School of Basic Medical Science,Xinxiang Medical University,Xinxiang,He’nan 453003,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Takifugu rubripes Sirt1 gene expression cDNA cloning prokaryotic expression |
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