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| 鲤鱼白细胞介素-8全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析 | |
| 引用本文： | 谭业平,孙晓义,卢强,李莲瑞,邓洪宽,付宝权.鲤鱼白细胞介素-8全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析[J].中国兽医学报,2008,28(6). |
| 作者姓名： | 谭业平 孙晓义 卢强 李莲瑞 邓洪宽 付宝权 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学,人兽共患病教育部重点实验室,吉林长春,130062 2. 新疆塔里木大学动物科技学院,新疆阿拉尔,843300 3. 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州,730046 |
| 摘 要： | 用DD-RTPCR的方法获得差异显示片段A26,经地高辛标记作为探针对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得阳性克隆。序列分析表明该克隆含有1个大小为294bp编码98个氨基酸的完整开放阅读框,氨基酸序列含有Chemokine-CXC功能结构域,前体中含有22个氨基酸组成的引导肽,氨基酸序列比对显示成熟白细胞介素-8(IL-8)多肽中第12、13和14构成CXC基序,但之前无ELR基序。系统发生分析其与荷兰鲤鱼亲缘关系最近,氨基酸序列的同源性达89%。分离培养鲤鱼外周血白细胞,在不同条件下经LPS、PHA和ConA刺激后,提取总RNA,根据鲤鱼IL-8全长cDNA序列和β-ac-tin序列设计引物,利用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对鲤鱼外周血白细胞IL-8进行差异表达分析,结果显示,经有丝分裂原刺激后前期(4h)白细胞中IL-8的表达量明显增大,但随着时间推移(12、24h)并不一直比同期正常白细胞表达量大,表达量趋势成峰形图。 |
| 关 键 词： | 鲤鱼 IL-8 cDNA克隆 鉴定 差异表达分析 鲤鱼 白细胞介素 克隆 差异 表达分析 Cloning carp expression analysis differential 峰形 趋势 时间推移 表达量 结果 聚合酶链式反应 定量反转录 利用 序列设计 提取 ConA |
Cloning, identification and differential expression analysis of the interleukin-8 full-Length cDNA from carp |
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| TAN Ye-ping,SUN Xiao-yi,LU Qiang,LI Lian-rui,DENG Hong-kuan,FU Bao-quan.Cloning, identification and differential expression analysis of the interleukin-8 full-Length cDNA from carp[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(6). | |
| Authors: | TAN Ye-ping SUN Xiao-yi LU Qiang LI Lian-rui DENG Hong-kuan FU Bao-quan |
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| Keywords: | |
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