犬白细胞介素-2 基因(IL-2 )的克隆与表达 |
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引用本文: | 魏晓锋,李春华,李祥瑞,徐立新.犬白细胞介素-2 基因(IL-2 )的克隆与表达[J].农业生物技术学报,2004,12(3):268-272. |
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作者姓名: | 魏晓锋 李春华 李祥瑞 徐立新 |
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作者单位: | 1. 上海市实验动物质量监督检测站 2. 南京农业大学动物医学院,南京,210095 |
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摘 要: | 根据GenBank上发表的犬(Canis familiaris)IL-2基因序列,设计了1对引物。采用RT-PCR技术,以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出犬IL-2基因。琼脂糖凝胶电泳显示扩增片段约为550bp。分离纯化片段,克隆入pMD18-T载体,经酶切鉴定,测序结果显示,克隆的犬IL-2基因与GenBank上发表的序列一致,生物软件分析结果表明该序列与牛、羊和鹿的亲源性更近。构建表达质粒pET28-CaIL-2,转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,IPTG诱导表达,SDS—PAGE电泳显示21.8kD左右的表达条带。MTT比色法测定活性结果表明:表达的重组犬IL-2蛋白具有极显著的体外增殖活化淋巴细胞的活性。
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关 键 词: | 犬 白细胞介素-2 基因 IL-2 克隆 表达 引物 |
修稿时间: | 2003年5月6日 |
Cloning of Canine Interleukin-2 (IL-2)Gene and Its Expression in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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