| 小麦叶片蛋白质组分析中高丰度蛋白Rubisco酶的快速去除方法研究 |
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| 引用本文： | 李红兵,康振生.小麦叶片蛋白质组分析中高丰度蛋白Rubisco酶的快速去除方法研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(6):223-228. |
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| 作者姓名： | 李红兵 康振生 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 生命科学学院,陕西省农业分子生物学重点实验室;西北农林科技大学 生命科学学院,陕西省农业分子生物学重点实验室 |
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| 基金项目： | 公益性行业（农业）科研专项(200903035-02)；高等学校学科创新引智计划项目(B07049) |
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| 摘 要： | 【目的】建立一种小麦叶片蛋白质组分析时去除全蛋白提取物中高丰度蛋白Rubisco酶的方法,为富集低丰度蛋白,提高双向电泳灵敏度提供技术支持。【方法】采用分离技术,以铭贤169小麦苗期叶片为材料,使用不同浓度(1,2,5,10 mmol/L)的肌醇六磷酸钠,结合二水氯化钙在不同温度(4,20,37℃)去除小麦叶片蛋白中的Rubi-sco酶,筛选去除小麦叶片蛋白Rubisco酶的最佳条件,并采用一维凝胶电泳(1-DE)、Western blot方法检测去除Rubisco酶的有效性,用二维凝胶电泳(2-DE)评估该方法对样品在二维凝胶上分辨率的影响。【结果】在37℃条件下,采用10 mmol/L肌醇六磷酸钠结合10 mmol/L的二水氯化钙去除小麦叶片蛋白中的Rubisco酶,可以获得较好的去除效果。在上述条件下作用10 min,小麦叶片水溶性蛋白提取物中超过80%的Rubisco酶得以沉淀去除,二维电泳图谱上有更多的低丰度蛋白点显现,且水平条纹明显减少,分辨率有所提高。【结论】得到了一种用于小麦叶片蛋白质组分析时去除高丰度蛋白Rubisco酶的方法,该方法具有快速、高效、成本低的特点。
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| 关 键 词： | 蛋白质组 小麦叶片 分离技术 Western blot 双向电泳 |
| 收稿时间： | 2010/12/10 0:00:00 |
Study of a rapid method for depletion of highly abundant protein Rubisco enzyme from wheat (T.aestivum) leaf for proteome analysis |
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| LI Hong-bing,KANG Zhen-sheng.Study of a rapid method for depletion of highly abundant protein Rubisco enzyme from wheat (T.aestivum) leaf for proteome analysis[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(6):223-228. |
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| Authors: | LI Hong-bing KANG Zhen-sheng |
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| Institution: | LI Hong-bing,KANG Zhen-sheng (College of Life Science and Shaanxi Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | proteome wheat leaf fractionation technique Western blot Two-Dimension electrophoresis (2-DE) |
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