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瓠瓜类型砧木品种根系DNA提取方法比较及指纹图谱构建
引用本文:宋慧,张香琴,应泉盛,严蕾艳,王迎儿,王毓洪.瓠瓜类型砧木品种根系DNA提取方法比较及指纹图谱构建[J].分子植物育种,2015(2):401-408.
作者姓名:宋慧  张香琴  应泉盛  严蕾艳  王迎儿  王毓洪
作者单位:宁波市农业科学研究院蔬菜研究所,宁波市瓜菜育种重点实验室
基金项目:国家自然基金(31000907);公益性行业(农业)科研专项(201403032);国家西甜瓜产业技术体系(nycytx-36);宁波市瓜类砧木育种创新团队(2014B81002);宁波市瓜菜育种重点实验室(2014A22007)共同资助
摘    要:为利用瓠瓜砧木根系提取DNA进行品种真实性分子检测,本研究比较了CTAB法(方法 1)、SDS简易法(方法 2)、SDS法(方法 3)、TPS法(方法 4)、快速制备法(方法 5)和简易快速制备法(方法 6)提取瓠瓜类型砧木根系基因组DNA的效果。研究结果表明,SDS简易法(方法 2)提取瓠瓜根系总DNA质量好,蛋白污染小,PCR扩增条带清晰稳定,满足瓠瓜根系DNA分子检测的要求。利用该法提取的‘甬砧1号’、‘甬砧3号’、‘甬砧4号’、‘甬砧5号’、‘神通力’和‘京欣砧1号’的根系DNA可重复上述6份瓠瓜材料幼叶DNA的指纹图谱结果(01001,10010,10101,01010,00110和00000)。新增加‘华欣948’、‘5756’、‘1715’和‘56YZ2’等4份瓠瓜砧木材料,通过根系DNA构建的指纹图谱分别是00110、01011、11000和01000。10份瓠瓜类型砧木品种根系DNA指纹图谱出现概率为1/13 500,图谱出现概率低,表明可以利用根系取代叶片提取DNA,用于构建指纹图谱进行品种鉴定与保护。

关 键 词:瓠瓜  根系  DNA制备  指纹图谱
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