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免疫外科法制备牛供体细胞核胞体及其核移植研究
引用本文:杨利军,李瑶,黄翔华,李云霞,赵宇航,李煜.免疫外科法制备牛供体细胞核胞体及其核移植研究[J].中国奶牛,2009(9):12-17.
作者姓名:杨利军  李瑶  黄翔华  李云霞  赵宇航  李煜
作者单位:内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室,呼和浩特,010021
基金项目:国家自然科学基金,内蒙古自治区自然科学基金 
摘    要:本研究利用自制的兔抗牛脾细胞免疫血清裂解供体细胞膜而获得核胞体,结果表明,自制的免疫血清可以成功的裂解供体细胞膜而获得核胞体。将该法制备的核胞体应用于牛体细胞核移植的胞质内注射中,从而为核移植中供体细胞核胞体的获得提供一种新的思路。在比较不同供体细胞对重构胚发育的影响时。结果表明。颗粒细胞与耳成纤维细胞构建的重构胚卵裂率没有显著差异(62.62%versus67.89%,P〉0.05),囊胚率也没有明显的差异(23.88% versus 18.92%,P〉0.05):在4℃低温冷藏一定时间的供体细胞与未经冷藏的供体细胞,其卵裂率和囊胚率都没有显著性差异(63.34%versus62.03%;26.67%versus24.45%,P〉0.05);同样,耳成纤维细胞也得到相同的结果(70.76%verSus66.67%:21.74%versus19.56%,P〉0.05)。颗粒细胞构建的重构胚在注核后3~5h进行激活较1~3h有更高的卵裂率.表现出显著性差异(73.91%versus56.52%,P〈0.05),裳胚率无显著性差异(23.53%,versus15.38%,P〉0.05)。

关 键 词:免疫外科法  供体细胞    体细胞核移植  胞质内注射

Preparation of Donor Nuclei by Immunosurgery and Application in Bovine Somatic Cell Nuclear Transfer
Abstract:
Keywords:
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