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犬腺病毒I型和II型TaqMan双重荧光定量PCR方法的建立
引用本文:巨敏莹,王艳杰,刘东霞,张斌,韩宇,乌吉斯古楞,宋庆庆,关平原.犬腺病毒I型和II型TaqMan双重荧光定量PCR方法的建立[J].中国动物检疫,2019,36(11):83-88.
作者姓名:巨敏莹  王艳杰  刘东霞  张斌  韩宇  乌吉斯古楞  宋庆庆  关平原
摘    要:为鉴别检测犬腺病毒(CAV)I型和II型,根据GenBank中CAV-I和CAV-II型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-I型和CAV-II型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-I的检测敏感度为100 copies/μL,对CAV-II的检测敏感度为10 copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的TaqMan双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-I和CAV-II型。本研究为CAV-I和CAV-II型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。

关 键 词:犬腺病毒I型  犬腺病毒  II型  TaqMan荧光定量PCR  检测方法

Establishment of a TaqMan Duplex Real-time PCR Method for Detection of Type I and II Canine Adenoviruses
Ju Minying,Wang Yanjie,Liu Dongxi,Zhang Bin,Han Yu,Wujisiguleng,Song Qingqing,Guan Pingyuan.Establishment of a TaqMan Duplex Real-time PCR Method for Detection of Type I and II Canine Adenoviruses[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(11):83-88.
Authors:Ju Minying  Wang Yanjie  Liu Dongxi  Zhang Bin  Han Yu  Wujisiguleng  Song Qingqing  Guan Pingyuan
Abstract:
Keywords:
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