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| 草鱼脂肪酸结合蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 陈立祥,邹增丁,苏建明,章怀云,肖调义.草鱼脂肪酸结合蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2008,34(1):45-49. |
| 作者姓名： | 陈立祥 邹增丁 苏建明 章怀云 肖调义 |
| 作者单位： | 1. 湖南农业大学,动物科技学院,湖南,长沙410128 2. 湖南农业大学,动物医学院,湖南,长沙,410128 3. 中南林业科技大学,湖南,株洲412006 |
| 基金项目： | 湖南省重大科技专项子课题 |
| 摘 要： | 根据GenBank上已发表的其他物种的脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein, FABP)基因序列设计1对引物,从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)cDNA文库中扩增出脂肪酸结合蛋白基因,定向克隆于表达质粒载体pET32A中构建成pET32A-FABP重组体,将重组体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,以终浓度1 mmol·L-1的IPTG对其进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳分析表明,与阴性对照相比,阳性克隆在分子量33 kDa处有1条明显的蛋白带,大小与预期结果一致.经光密度分析可知,目的蛋白约占总可溶性蛋白的49.5%.这为进一步研究脂肪酸结合蛋白生物学特性以及FABP基因对脂肪代谢调控规律奠定了基础. |
| 关 键 词： | 草鱼 脂肪酸结合蛋白 基因表达 克隆 |
| 文章编号： | 1008-9209（2008）01-0045-05 |
| 收稿时间： | 2007-04-03 |
| 修稿时间： | 2007年4月3日 |
Gene cloning and expression of fatty acid-binding protein from grass carps (Ctenopharyngodon idellus) in Escherichia coli. |
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| CHEN Li-xiang,ZOU Zeng-ding,SU Jian-ming,ZHANG Huai-yun,XIAO Tiao-yi.Gene cloning and expression of fatty acid-binding protein from grass carps (Ctenopharyngodon idellus) in Escherichia coli.[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2008,34(1):45-49. | |
| Authors: | CHEN Li-xiang ZOU Zeng-ding SU Jian-ming ZHANG Huai-yun XIAO Tiao-yi |
| Abstract: | A pair of primers were designed based on the conservative sequences of FABP gene of other species published in the GenBank,and the FABP gene was amplified using grass carp(Ctenopharyngodon idellus) cDNA library as templates.Then the FABP gene was directionally cloned into expression vector pET32A to construct pET32A-FABP recombinant.This recombinant was transformed into Escherichia coli BL21(DE3).After induction by IPTG,an expected 33 kDa protein was found by SDS-PAGE analysis,accounting for 49.5% of total soluble protein.The result lays helpful foundation for understanding the biological function of fatty acid-binding protein and effects of FABP gene on fatty acid metabolism. |
| Keywords: | grass carps fatty acid-binding protein gene expression cloning |
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