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| 鲫源嗜水气单胞菌毒力基因多重PCR检测及ERIC-PCR分子分型 | |
| 引用本文： | 符贵红,肖丹,胡鲲,杨先乐.鲫源嗜水气单胞菌毒力基因多重PCR检测及ERIC-PCR分子分型[J].海洋渔业,2014,36(6). |
| 作者姓名： | 符贵红 肖丹 胡鲲 杨先乐 |
| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院东海水产研究所,农业部东海与远洋渔业资源开发利用实验室,上海200090 2. 湖北省武汉市黄陂区水产技术推广站,武汉,430300 3. 上海海洋大学水产与生命学院,国家水生动物病原库,上海201306 |
| 基金项目： | 科技部863计划项目，现代农业产业技术体系建设专项资金资助 |
| 摘 要： | 为快速了解鲫源嗜水气单胞菌株毒力基因携带情况及与菌株基因型的相关性,建立多重PCR法和ERIC-PCR分子分型,为临床快速检测、菌株分型和菌株致病性分析提供依据。通过单重PCR法检测出标准菌株ATCC7966内5个毒力基因气溶素(aerolysin,aer)、溶血素(hemolysin,hly)、细胞毒性肠毒素(cytotoxic enterotoxin,alt)、胞外蛋白酶(extracellular protease,ahp)和细胞肠兴奋性肠毒素(intestinal cells of excitatory enterotoxin,act),其扩增产物长度依次为300 bp、592 bp、442 bp、856 bp和500 bp。在此基础上,优化并建立特异性高,敏感度达7.2×102cfu·m L-1多重PCR法,用于检测从江苏射阳地区患病水产动物体内分离的17株嗜水气单胞菌5个毒力基因携带率。结果显示,毒力基因act的携带率为100%,而80%的菌株5个毒力基因均有检出。采用ERIC-PCR分子分型技术,以标准菌株ATCC7966为对照,对17株鲫源致病性嗜水气单胞菌进行基因分型,获得两种基因型,分别描述为A型和B型,其中B型菌株14株,带型与ATCC7966一致,认为是当地的主要流行株。探究菌株基因型与毒力基因分布相关性,携带5个毒力基因的均为B型菌株,而所有A型菌株存在一或多个毒力基因缺失,有可能是此类菌株更易发生毒力基因漂变,但还需进一步研究。 |
| 关 键 词： | 嗜水气单胞菌 毒力基因 ERIC-PCR 分子分型 |
Multiplex PCR and ERIC-PCR genotype in virulence genes of Aeromonas hydrophila in Crucian carp |
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| FU Gui-hong,XIAO Dan,HU Kun,YANG Xian-le.Multiplex PCR and ERIC-PCR genotype in virulence genes of Aeromonas hydrophila in Crucian carp[J].Marine Fisheries,2014,36(6). | |
| Authors: | FU Gui-hong XIAO Dan HU Kun YANG Xian-le |
| Abstract: | |
| Keywords: | Aeromonas hydrophila virulence gene ERIC-PCR molecular genotype |
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