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果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达
引用本文:高秋芳,郭安平,孔华,邓伟科,贺立卡.果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达[J].广东农业科学,2010,37(8):1-5.
作者姓名:高秋芳  郭安平  孔华  邓伟科  贺立卡
作者单位:1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101;海南大学农学院,海南,海口,570228
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南,海口,571101
基金项目:国家"863"计划项目,国家公益性行业科研专项 
摘    要:运用RT-PCR技术,从绿色木霉(AS3.3711)mRNA中扩增出木聚糖酶基因xyn2,并与质粒pPIC9K相连,构建了表达载体pPIC9K-xyn2,转化毕赤酵母GS115,并且将pPIC9K-xyn2和pPIC9K-PelC(果胶裂解酶)同时转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,分别得到一株高表达木聚糖酶毕赤酵母菌株X5和一株同时高表达木聚糖酶和果胶裂解酶毕赤酵母菌株PX6。同时,将一株高表达果胶裂解酶毕赤酵母菌株P2保存。重组酶酶学性质分析表明,P2和PX6分泌果胶裂解酶,X5和PX6分泌木聚糖酶最适温度均为50℃;P2分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为14.2U/mL;X5分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为5.8U/mL;PX6分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为12.6U/mL,分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为4.2U/mL。

关 键 词:果胶裂解酶  木聚糖酶  表达  毕赤酵母

Expression of pectin lyase gene、 xylanase gene、 pectin lyase gene and Xylanase gene in Pichia pastoris
GAO Qiu-fang,GUO An-ping,KONG Hua,DENG Wei-ke,HE Li-ka.Expression of pectin lyase gene、 xylanase gene、 pectin lyase gene and Xylanase gene in Pichia pastoris[J].Guangdong Agricultural Sciences,2010,37(8):1-5.
Authors:GAO Qiu-fang  GUO An-ping  KONG Hua  DENG Wei-ke  HE Li-ka
Institution:GAO Qiu-fang1,2,GUO An-ping1,KONG Hua1,DENG Wei-ke1,HE Li-ka1 (1.Institute of Tropical Biosciences and Biotechnology,China Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key laboratory of ministry of Agriculture for Tropical Crop Biotechnology,Haikou 571101,China,2.College of Agronomy,Hainan University,Haikou 570228,China)
Abstract:
Keywords:Pectin lyase  Xylanase  expression  Pichia pastoris  
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