| 猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 冉旭华,李树东,闻晓波,王密,杨焕民,倪宏波,侯喜林,朴范泽,邵磊,李晓娟,李冬野,周恩民.猪圆环病毒2型ORF3基因的原核表达[J].中国畜牧兽医,2010,37(6):171-174. |
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| 作者姓名： | 冉旭华 李树东 闻晓波 王密 杨焕民 倪宏波 侯喜林 朴范泽 邵磊 李晓娟 李冬野 周恩民 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,预防兽医学省重点实验室,大庆,163319 |
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| 基金项目： | 黑龙江省农垦总局课题，黑龙江八一农垦大学博士科研启动项目 |
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| 摘 要： | 用原核表达系统表达猪圆环病毒2型ORF3基因,分析ORF3蛋白的抗原性。根据GenBank上公布的猪圆环病毒2型(PCV-2)核苷酸序列进行分析,针对ORF3基因设计并合成1对特异性引物,PCR扩增该基因,并将此片段克隆入原核表达载体pET-32a(+)上,命名为pET32a-ORF3,转化大肠杆菌Rosetta-blue(DE3)pLacⅠ感受态细胞,1.0mmol/L IPTG37℃诱导表达。结果表明,PCR扩增得到315bp的片段,重组蛋白大小约为29ku,与预期大小相符。Western blotting分析结果表明,重组蛋白能与抗His-tag的单克隆抗体反应,不与PCV-2阳性血清发生反应。猪圆环病毒2型ORF3基因能在大肠杆菌中成功表达,但与阳性血清之间没有反应原性,为进一步研究PCV-2ORF3蛋白的功能及特性奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 ORF3基因 原核表达 |
Cloning and Expression of ORF3 Gene of Porcine Circovirus Type 2 in E.coil |
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| RAN Xu-hua,LI Shu-dong,WEN Xiao-bo,WANG Mi,YANG Huan-min,NI Hong-bo,HOU Xi-lin,PIAO Fan-ze,SHAO Lei,LI Xiao-juan,LI Dong-ye,ZHOU En-min.Cloning and Expression of ORF3 Gene of Porcine Circovirus Type 2 in E.coil[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2010,37(6):171-174. |
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| Authors: | RAN Xu-hua LI Shu-dong WEN Xiao-bo WANG Mi YANG Huan-min NI Hong-bo HOU Xi-lin PIAO Fan-ze SHAO Lei LI Xiao-juan LI Dong-ye ZHOU En-min |
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