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猪Sar1b基因的分子克隆、序列分析及原核表达
引用本文:王学敏,刘榜,赵书红,樊斌,朱猛进,余梅,熊统安,李奎.猪Sar1b基因的分子克隆、序列分析及原核表达[J].畜牧兽医学报,2007,38(7):625-629.
作者姓名:王学敏  刘榜  赵书红  樊斌  朱猛进  余梅  熊统安  李奎
作者单位:1. 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070;江苏省农业科学院畜牧研究所,南京,210014
2. 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070
3. 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉430070;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094
基金项目:国家自然科学基金重点项目(30330440)
摘    要:根据GenBank已发表的猪Sar1b基因序列(GenBank登录号:AY819557)设计1对引物,以猪肝脏组织总RNA的反转录产物为扩增模板,用RT-PCR方法扩增出猪Sar1b基因cDNA全长编码区,经过EcoRI-SalI双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-Sar1b重组原核表达载体。将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol/LITPG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为26 ku,与预期表达蛋白大小一致。Western blot检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。猪Sar1b基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础。

关 键 词:  Sar1b基因  克隆  原核表达
文章编号:0366-6964(2007)07-0625-05
修稿时间:2006-07-03

Molecular Cloning, Sequence Analysis and Prokaryotic Expression of the Porcine Sar1b Gene
WANG Xue-min,LIU Bang,ZHAO Shu-hong,FAN Bin,ZHU Meng-jin,YU Mei,XIONG Tong-an,LI Kui.Molecular Cloning, Sequence Analysis and Prokaryotic Expression of the Porcine Sar1b Gene[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2007,38(7):625-629.
Authors:WANG Xue-min  LIU Bang  ZHAO Shu-hong  FAN Bin  ZHU Meng-jin  YU Mei  XIONG Tong-an  LI Kui
Institution:1. Key Laboratory of Animal Genetics, Breeding and Reproduction of Ministry of Education, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China ; 2. Institute of Animal Science, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;3. Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100094, China
Abstract:
Keywords:pig  Sar1b gene  cloning  prokaryotic expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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