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奶山羊BLG基因敲除载体的构建
引用本文:陈华涛,李倩,胡林勇,王爱华,靳亚平,刘军,杨艳.奶山羊BLG基因敲除载体的构建[J].中国兽医学报,2011,31(6).
作者姓名:陈华涛  李倩  胡林勇  王爱华  靳亚平  刘军  杨艳
作者单位:西北农林科技大学,动物医学院,农业部动物生殖生理和胚胎工程重点开放实验室,陕西杨凌712100
基金项目:转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08008-004)
摘    要:根据已知的BLG序列设计引物,通过PCR技术克隆同源臂序列,5′端同源臂2 264bp,包括外显子1,3′端同源臂4 461bp,包括全部的外显子3、4、5、6、7,分别连入克隆载体pMD18-T Simple载体中并测序。然后以含有正负筛选标记基因的ploxpⅡ载体为基础,将5′端和3′端同源臂片段先后连入其中,进行酶切、PCR鉴定。将构建好的基因敲除载体转化组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌BM25.8,验证Loxp位点的活性。结果表明,构建了奶山羊BLG基因第2外显子缺失的基因敲除载体pBLG2T,且pBLG2T载体中的正选neo基因可以被Cre重组酶去除。为获得BLG 1条等位基因缺失型细胞株以及培育高产优质奶山羊新品种奠定基础。

关 键 词:奶山羊  BLG基因  基因敲除  打靶载体  

Construction of diary goat BLG gene knockout vector
CHEN Hua-tao,LI Qian,HU Lin-yong,WANG Ai-hua,JIN Ya-ping,LIU Jun,YANG Yan.Construction of diary goat BLG gene knockout vector[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(6).
Authors:CHEN Hua-tao  LI Qian  HU Lin-yong  WANG Ai-hua  JIN Ya-ping  LIU Jun  YANG Yan
Institution:CHEN Hua-tao,LI Qian,HU Lin-yong,WANG Ai-hua,JIN Ya-ping,LIU Jun,YANG Yan(Key Laboratory of Animal Reproductive Endocrinology and Embryo Biotechology of Agriculture Ministry of China,College of Animal Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China)
Abstract:
Keywords:dairy goat  BLG gene  gene knockout  gene targeting vector  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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