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四川莴笋上番茄斑萎病毒的电镜观察与小RNA测序鉴定
引用本文:韩帅,吴婕,张河庆,席亚东.四川莴笋上番茄斑萎病毒的电镜观察与小RNA测序鉴定[J].园艺学报,2022(9):2007-2016.
作者姓名:韩帅  吴婕  张河庆  席亚东
作者单位:1. 四川省农业科学院植物保护研究所农业农村部西南作物有害生物综合治理重点实验室;2. 四川省农业科学院园艺研究所蔬菜种质与品种创新四川省重点实验室
基金项目:四川省科技计划项目(2021YFYZ0021);
摘    要:为明确引起四川彭州莴笋病毒病的病毒种类,通过生物接种和电子显微镜方法,结合小RNA测序技术和反转录PCR对采集病样进行鉴定和分析。摩擦接种试验表明回接莴笋的发病症状与田间相似,矮牵牛叶片出现局部枯斑;利用电镜可观察到叶肉细胞中有大量病毒粒体聚集于内质网池,其形态特征与正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒相似;通过小RNA测序技术获得了番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)接近全长的序列,表明侵染该批次莴笋样品的病原物可能是TSWV。利用RT-PCR方法确定田间和回接莴笋及枯斑寄主中均存在TSWV,进一步证明四川彭州莴笋病毒病是由TSWV侵染引起的,这是四川首次发现TSWV为害莴笋。对拼接序列和N基因序列分别构建系统发育树可知,彭州分离物TSWV-SCPZ分别与韩国分离物(YY和K)和美国分离物(MR-01)亲缘关系最近。

关 键 词:莴笋  番茄斑萎病毒  小RNA测序  电子显微技术
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