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禽网状内皮组织增生病病毒套式PCR检测方法的建立
引用本文:毕研丽,孙翠平,王金良,郭广君,吕素芳,苗立中,沈志强.禽网状内皮组织增生病病毒套式PCR检测方法的建立[J].畜牧与兽医,2011,43(12).
作者姓名:毕研丽  孙翠平  王金良  郭广君  吕素芳  苗立中  沈志强
作者单位:1. 山东绿都生物科技有限公司,山东滨州,256600
2. 山东绿都生物科技有限公司,山东滨州256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东州256600
基金项目:山东省自主创新成果转化重大专项项目
摘    要:根据GenBank中登录的禽网状内皮组织增生病病毒(REV)基因组序列,设计合成了2对引物,外部引物的扩增片段大小为467 bp,内部引物的扩增片段大小为314 bp,建立了适合REV快速检测的套式PCR方法。采用该方法对REV毒株进行了检测,结果显示能扩增到314 bp的条带;禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、减蛋综合征病毒、禽白血病病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性。该方法第1次扩增的敏感性是100 pg,第2次扩增的敏感性是1 fg,第2次比第1次扩增的敏感性高105倍。所建立的套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于禽网状内皮组织增生病的临床诊断和分子流行病学调查。

关 键 词:禽网状内皮组织增生病病毒  套式PCR  检测
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