| 外源ABA处理大麦胚的均一化cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 曹玲珑,李冬兵,熊大斌,牛洪斌,姜玉梅,尹 钧.外源ABA处理大麦胚的均一化cDNA文库的构建[J].麦类作物学报,2014,34(7):912-916. |
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| 作者姓名： | 曹玲珑 李冬兵 熊大斌 牛洪斌 姜玉梅 尹 钧 |
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| 作者单位： | （河南农业大学,河南粮食作物协同创新中心，小麦玉米作物学国家重点实验室，国家小麦工程技术研究中心,河南郑州 450002） |
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| 基金项目： | 国家转基因新品种培育重大专项（2011ZX08002 003）；作物分子育种与品种创制项目（2012AA101105） |
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| 摘 要： | 构建外源ABA处理大麦胚的均一化cDNA文库是利用酵母双杂交方法筛选与靶蛋白相互作用蛋白的前提条件。为给大麦抗逆基因的研究及抗逆转基因大麦材料的创制奠定基础,利用5μmol·L-1ABA和蒸馏水分别处理大麦种子0h、6h、12h、24h,剥取大麦的胚,用热酚法提取总RNA,利用SMART原理进行反转录PCR并进行均一化处理获得ds-cDNA。经SfiⅠ酶切的ds-cDNA与pGADT7-Rec载体连接后,转化大肠杆菌感受态细胞DH10B构建文库。结果表明,文库的容量为1.1×106,插入片段大于1 000bp,集中在1 000~3 000bp之间,符合酵母双杂交文库的要求。
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| 关 键 词： | 外源ABA 大麦 cDNA文库 |
Construction of a Normalized cDNA Library of Barley Embryo Treated with Exogenous ABA |
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| CAO Linglong,LI Dongbing,XIONG Dabin,NIU Hongbin,JIANG Yumei,YIN Jun.Construction of a Normalized cDNA Library of Barley Embryo Treated with Exogenous ABA[J].Journal of Triticeae Crops,2014,34(7):912-916. |
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| Authors: | CAO Linglong LI Dongbing XIONG Dabin NIU Hongbin JIANG Yumei YIN Jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Exogenous ABA Barley cDNA library |
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