| 马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建 |
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| 引用本文： | 朱春辉,汤艳东,那雷,付丽华,王雪峰,林跃智,杜承,周建华,徐方.马Viperin的抗EIAV功能初步研究及其重组腺病毒的构建[J].中国预防兽医学报,2014(5):346-349. |
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| 作者姓名： | 朱春辉 汤艳东 那雷 付丽华 王雪峰 林跃智 杜承 周建华 徐方 |
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| 作者单位： | 宁夏医科大学基础医学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室 |
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| 基金项目： | 国家十二五重大新药创制(2011ZX09307-303);国家自然科学基金面上项目(31070809);兽医生物技术国家重点实验基本科研业务费(SKLVBP201312) |
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| 摘 要： | Viperin是一种细胞内抗病毒蛋白,可以被I型干扰素、多聚I:C、脂多糖及多种病毒诱导表达,在细胞内主要定位在内质网和脂滴,具有广谱的抗病毒功能。为研究马Viperin(eViperin)在抗病毒感染中的作用,本研究应用RT-PCR从马巨噬细胞中扩增eViperin基因,并将其克隆于真核表达载体pDC315中构建重组质粒pDC-eViperin-Flag,将重组质粒转染293T细胞,western blot检测结果表明eViperin在293T细胞中正确表达。将该重组表达质粒与表达马传染性贫血病毒(EIAV)Gag前体蛋白(Gag precursor,Pr55gag)的表达质粒共转染293T细胞,转染48 h后western blot检测,结果显示实验组细胞培养上清中的Pr55gag含量显著低于空白对照组,表明eViperin具有抑制EIAV释放的作用。此外,将该重组表达质粒与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,E3Cre共转染HEK293细胞,进一步构建拯救出表达eViperin的重组腺病毒,为研究eViperin的抗病毒功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | Viperin 马 马传染性贫血病毒 重组腺病毒 |
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