马铃薯Y病毒CP基因5′端和3′端反向重复结构介导的抗病性研究 |
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引用本文: | 李鹏,宋云枝,刘晓玲,朱常香,温孚江.马铃薯Y病毒CP基因5′端和3′端反向重复结构介导的抗病性研究[J].植物病理学报,2007(1). |
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作者姓名: | 李鹏 宋云枝 刘晓玲 朱常香 温孚江 |
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作者单位: | 山东农业大学植物保护学院,山东农业大学生命科学学院,山东农业大学植物保护学院,山东农业大学生命科学学院,山东农业大学生命科学学院 泰安271018,泰安271018,山东省作物生物学重点实验室,泰安271018,泰安271018,泰安271018,山东省作物生物学重点实验室,泰安271018,泰安271018 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30471139,30500327) |
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摘 要: | 本研究克隆了来源于马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)外壳蛋白(CP)基因(PVYNCP)5′端和3′端的反向重复cDNA序列,并构建了植物表达载体pROKII-5′IR和pROKII-3′IR,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草NC89,分别获得166和126株转基因烟草。抗病性试验表明,转化PVYNCP基因3′端茎50 bp(环50 bp)hp RNA(hairpin RNA)的烟草抗病率达69%,而转化PVYNCP基因5′端相同片段长度的hpRNA的烟草却全部发病。Southern blot结果表明,转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性;Northern blot结果表明,目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的抗病性。研究结果证明PVYNCP基因的3′端比5′端更能有效地诱发基因沉默,并且hpRNA茎部的长度可减少到50 bp。该结果为探索利用CP基因的最短长度和有效部位的基因片段来培育多抗病毒转基因植物提供了依据。
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关 键 词: | RNA介导的基因沉默 反向重复结构 hpRNA 马铃薯Y病毒 |
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