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产肠毒素性大肠杆菌K88与K99菌毛蛋白的串联表达
引用本文:逄媛,崔言顺,沈志强,聂小想,王金良,郭广君,李建亮.产肠毒素性大肠杆菌K88与K99菌毛蛋白的串联表达[J].中国兽医学报,2009,29(4).
作者姓名:逄媛  崔言顺  沈志强  聂小想  王金良  郭广君  李建亮
作者单位:1. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600
2. 山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271018
3. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600
摘    要:根据GenBank中发表的E.coli K88、K99基因序列,分别设计合成1对引物.利用PCR技术,以大肠杆菌C83907和C83644的质粒为模板分别扩增不含信号肽的K88及K99基因.通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切,连接和转化,构建了含K88-K99串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pETK88CK99).结果显示,经酶切,PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETK88CK99中含有K88K99融合基因,且基因序列和阅读框架均正确.经过SDS-PAGE分析,串联表达蛋白含量占菌体蛋白的40%左右,经Western blotting检测,该串联表达蛋白能被大肠杆菌K88、K99标准血清识别.结果表明,构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株.

关 键 词:大肠杆菌  串联表达

Co-expressions of fimbrial subunit gene K88 and K99 of enterotoxigenic Escherichia coli
PANG Yuan,CUI Yan-shun,SHEN Zhi-qiang,NIE Xiao-xiang,WANG Jin-liang,GUO guang-jun,LI Jian-liang.Co-expressions of fimbrial subunit gene K88 and K99 of enterotoxigenic Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(4).
Authors:PANG Yuan  CUI Yan-shun  SHEN Zhi-qiang  NIE Xiao-xiang  WANG Jin-liang  GUO guang-jun  LI Jian-liang
Abstract:
Keywords:K88  K99
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