| 基于鸡白痢沙门菌LPS的D群沙门菌抗体间接ELISA检测方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 蒋凤娇,程伊洛,汪最,张文婷,卢琴,郭云清,罗青平,邵华斌,张腾飞.基于鸡白痢沙门菌LPS的D群沙门菌抗体间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医学报,2022(12):2401-2406. |
| |
| 作者姓名： | 蒋凤娇 程伊洛 汪最 张文婷 卢琴 郭云清 罗青平 邵华斌 张腾飞 |
| |
| 作者单位： | 1. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北省重点实验室;2. 华中农业大学动物医学院 |
| |
| 基金项目： | 国家肉鸡产业技术体系资助项目(CARS-41-G13)；;湖北省自然科学基金创新群体资助项目(2021CFA019)； |
| |
| 摘 要： | 通过热酚水法提取并纯化鸡白痢沙门菌的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS),以LPS作为包被抗原，建立D群沙门菌抗体间接ELISA检测方法。结果显示，通过方阵滴定法等确定抗原包被质量浓度为2.233 mg/L;血清最佳稀释度为1∶200,最佳作用时间为60 min;最适封闭条件为5%脱脂乳封闭60 min;酶标二抗最适工作质量浓度为1∶8 000,作用60 min;底物显色时间为15 min;阴阳性判定标准为S/P值≥0.5。特异性、敏感性和重复性验证表明，该方法可特异性检测鸡白痢沙门菌等D群沙门菌的阳性血清，与鼠伤寒沙门菌、大肠杆菌等家禽病原菌的阳性血清无交叉反应，其检测灵敏度是鸡白痢平板凝集的400倍，批间重复和批内重复变异系数均小于10%。对临床血清的检测结果表明，该方法与Biochek公司的D群抗体检测试剂盒的阳性符合率为94.67%,阴性符合率为98.11%,总符合率为98.59%。结果表明，该检测方法可用于临床鸡白痢沙门菌等D群沙门菌感染的抗体检测。
|
| 关 键 词： | 鸡白痢沙门菌 脂多糖 D群沙门菌 间接ELISA 抗体检测 |
|
|
